近年來(lái),隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展,畜禽養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大,動(dòng)物疾病也隨之增加,呈現(xiàn)出更加復(fù)雜化的特點(diǎn)。細(xì)菌性疾病作為危害畜牧業(yè)發(fā)展的一類重要疾病,目前呈現(xiàn)出了多種發(fā)病狀態(tài)。本文是一篇畜牧養(yǎng)殖論文范文,主要論述了應(yīng)用藥敏紙片法指導(dǎo)獸醫(yī)臨床用藥體會(huì)。
摘 要:藥敏試驗(yàn)是指對(duì)敏感性不能預(yù)測(cè)的分離菌株進(jìn)行試驗(yàn),在體外測(cè)試病原微生物對(duì)抗菌藥物的敏感程度,以指導(dǎo)獸醫(yī)臨床合理選擇治療藥物的微生物學(xué)試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)是獸醫(yī)臨床工作中的一項(xiàng)基本技能,而藥敏紙片法是藥敏試驗(yàn)中最普遍的方法。該文主要通過(guò)實(shí)例介紹了藥敏紙片法在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用及其指導(dǎo)意義,供同行參考。
關(guān)鍵詞:藥敏試驗(yàn),藥敏紙片法,耐藥性,接種培養(yǎng)
大多養(yǎng)殖戶由于飼養(yǎng)管理技術(shù)不高、動(dòng)物疫病的預(yù)防意識(shí)不強(qiáng),再加上缺乏動(dòng)物臨床診療知識(shí),對(duì)臨床發(fā)生的動(dòng)物疾病很難進(jìn)行準(zhǔn)確診斷和針對(duì)性的治療,一旦發(fā)病,不能對(duì)其發(fā)病原因進(jìn)行有效分析,導(dǎo)致盲目濫用抗生素,不但沒(méi)有控制病情,還造成了病情的延誤,而且產(chǎn)生了大量的耐藥菌株,不少耐藥菌株對(duì)多種抗生素產(chǎn)生耐藥性。筆者在臨床診療中遇到過(guò)很多次應(yīng)用抗生素治療細(xì)菌性疾病無(wú)效的情況。為了提高抗生素對(duì)細(xì)菌性疾病的治療效果,合理使用抗生素,獸醫(yī)工作者常用到藥敏試驗(yàn)來(lái)指導(dǎo)我們臨床用藥,而藥敏紙片法是藥敏試驗(yàn)中最普遍的方法,筆者常在臨床中應(yīng)用該方法收到了較為滿意的效果。
1 實(shí)驗(yàn)方法
1.1 藥敏紙片的制備 藥敏紙片法中使用的藥敏紙片市場(chǎng)上很容易購(gòu)買到,但也可自制,具體方法如下:取定性濾紙,用打孔器打成直徑6mm的圓形小紙片,根據(jù)實(shí)際需要制成相應(yīng)數(shù)量。以制成100片為例,將100片圓片放入清潔干燥的小瓶或小平皿中,包扎,經(jīng)15磅高壓滅菌15~20min后,置37℃溫箱中使其完全干燥。將供試驗(yàn)的抗菌藥物按其有效濃度稀釋成1mL,加入上述含有100片紙片的小瓶?jī)?nèi),不時(shí)翻動(dòng),使濾紙片與藥液充分混合,浸泡30min即可,置于37℃溫箱過(guò)夜或陰涼處干燥備用。在溫箱中的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免藥物失效。干燥完成后密封,放置冰箱中保存,切勿受潮,一般能保存4~6個(gè)月。
1.2 接種培養(yǎng) 取發(fā)病動(dòng)物的病料或組織(如心、血、脾、肝臟、淋巴結(jié)等)無(wú)菌接種到培養(yǎng)基中,在37℃溫箱中培養(yǎng)24h,挑選典型菌落備用。在超凈工作臺(tái)中或酒精燈旁,用接種環(huán)挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物,以劃線方式接種到固體培養(yǎng)基表面,或用無(wú)菌生理鹽水稀釋菌落,用蘸有菌懸液的無(wú)菌棉簽均勻涂布到固體培養(yǎng)基表面,蓋上平板,室溫放置數(shù)分鐘。然后用無(wú)菌鑷子將紙片粘貼于固體培養(yǎng)基表面,一定要注意紙片與培養(yǎng)基表面要完全接觸,各紙片中心間距應(yīng)大于24mm,并記錄每種藥敏紙片的位置。貼完后放置15min,再置于37℃溫箱中培養(yǎng)12~18h后觀察結(jié)果。必要時(shí),可做2組平行試驗(yàn),以致實(shí)驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確。
1.3 結(jié)果判定 用抑菌圈的直徑(φ)表示,抑菌圈的直徑越大,抑菌效果越好。即抑菌圈直徑(φ)≥20mm者為高度敏感;抑菌圈直徑16≤(φ)<20mm者為中度敏感;抑菌圈直徑10≤(φ)<16mm者為低度敏感;抑菌圈直徑(φ)<10mm者為耐藥。
2 臨床實(shí)例
貴池區(qū)梅龍街道某一養(yǎng)雞場(chǎng)飼養(yǎng)肉雞1 100余只,2013年4月12日開(kāi)始發(fā)病,發(fā)病當(dāng)日為36日齡,4月13日上午10:00許,筆者到現(xiàn)場(chǎng)時(shí),約有15%發(fā)病,已經(jīng)死亡8只,病雞表現(xiàn)為采食量下降,體溫升高,精神沉郁,羽毛松亂,離群呆立,縮頸閉眼,頭常縮于翅下,不愿走動(dòng),排淡黃色或黃白色稀便,泄殖腔下方羽毛潮濕,污穢粘連,有的呼吸困難,張口伸頸,咳嗽、打嗆。解剖癥狀明顯的兩只雞,發(fā)現(xiàn)實(shí)質(zhì)器官充血、淤血;氣囊發(fā)炎,氣囊壁渾濁,有黃白色纖維素性滲出物;肝腫脹,有灰白色壞死灶;肺充血淤血;脾、腎臟腫大;心包積液,心外膜有散在出血點(diǎn);腸炎腹水等癥狀,筆者根據(jù)臨床癥狀和病理變化懷疑是大腸桿菌感染(后經(jīng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和生化實(shí)驗(yàn)證實(shí))。隨后將解剖的兩只雞取其心肝組織,于當(dāng)日上午11:00在貴池區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心實(shí)驗(yàn)室做了藥敏試驗(yàn)(藥敏紙片法),4月15日上午08:00,藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示該菌株對(duì)氟苯尼考和硫酸新霉素敏感,筆者隨即告知養(yǎng)殖戶把治療藥物更換為氟苯尼考和硫酸新霉素。治療效果明顯,4月13日10:00到15日08:00共死亡23只雞,15日當(dāng)天死亡9只雞,15日之后共死亡7只雞。
3 總結(jié)與體會(huì)
隨著新型致病菌的不斷出現(xiàn),每種致病菌對(duì)不同的抗菌藥物的敏感性不同,同種細(xì)菌的不同菌株對(duì)同一抗菌藥物的敏感性也有差異,也就是說(shuō)再好的抗菌藥物和再好的獸醫(yī)人員,都不能保證所用的抗菌藥物是特效藥物,因此藥敏試驗(yàn)在獸醫(yī)工作中有著日益重要的實(shí)際意義。藥敏試驗(yàn)中的藥敏紙片法因其操作簡(jiǎn)單、成本較低的特點(diǎn),被大多數(shù)獸醫(yī)工作者所青睞。該方法優(yōu)點(diǎn)如下:一是能夠經(jīng)濟(jì)、有效地測(cè)定細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感程度,指導(dǎo)獸醫(yī)臨床合理用藥,使獸醫(yī)工作者能夠及時(shí)準(zhǔn)確的用藥,避免了抗生素的濫用,既節(jié)約了藥物的使用,又縮短了動(dòng)物病程,給養(yǎng)殖戶挽回了許多不必要的損失;二是可以及時(shí)選擇敏感藥物治療動(dòng)物疾病,規(guī)范了抗菌藥物的使用,延長(zhǎng)了新藥的使用壽命,還可以為新研制藥物性能評(píng)估提供有價(jià)值的信息;三是可以及時(shí)掌握各種菌種和菌株的耐藥性,對(duì)流行病學(xué)調(diào)查建立監(jiān)控,同時(shí)采取相應(yīng)的措施預(yù)防和控制細(xì)菌性疾病的流行,為動(dòng)物疫病預(yù)防與控制機(jī)構(gòu)提供防治依據(jù),有效控制區(qū)域性的細(xì)菌性疫病的發(fā)生。因此,獸醫(yī)工作人員要重視藥敏紙片法在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用。
畜牧養(yǎng)殖論文發(fā)表期刊推薦《青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》(季刊)創(chuàng)刊于1960年,是經(jīng)國(guó)家新聞出版總署批準(zhǔn)出版的國(guó)內(nèi)外公開(kāi)發(fā)行的綜合性學(xué)術(shù)期刊,由山東省教育廳主管、青島農(nóng)業(yè)大學(xué)主辦、《島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》編輯部編輯出版、發(fā)行。作為學(xué)術(shù)研究和科技信息主要交流平臺(tái),學(xué)報(bào)本著立足學(xué)校,面向全國(guó)的辦刊定位,突出“四個(gè)注重”,即注重學(xué)術(shù)性、注重應(yīng)用性、注重為學(xué)校教學(xué)科研服務(wù)、注重為區(qū)域經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展服務(wù),發(fā)揚(yáng)優(yōu)勢(shì)、突出特色。其辦刊宗旨是:“傳承文明,創(chuàng)新理論,增進(jìn)學(xué)術(shù)交流,推動(dòng)科學(xué)技術(shù)盡快轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力,服務(wù)社會(huì)”。
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