作者：顧杰 單位：陜西中醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院

實(shí)驗(yàn)標(biāo)本帶來的生物安全隱患實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的來源多樣，生化檢測時(shí)使用的體液或血液標(biāo)本，很可能攜帶有ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ、ＨＥＶ、ＨＩＶ、巨細(xì)胞病毒等具備生物危害性的各類感染因子，盡管處理這些標(biāo)本的都是專業(yè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員，但由于標(biāo)本情況未知或說明中缺乏相關(guān)描述，因此仍存在有很高的接觸風(fēng)險(xiǎn)。在對(duì)這些樣品進(jìn)行離心分離或渦旋混合的過程中，產(chǎn)生的氣溶膠會(huì)嚴(yán)重威脅到實(shí)驗(yàn)人員的健康。進(jìn)行標(biāo)本內(nèi)活細(xì)胞的分析／分選、ＣＤ３／ＣＤ４／ＣＤ８淋巴細(xì)胞表面抗原檢測、腫瘤細(xì)胞ＤＮＡ／ＲＮＡ含量分析、免疫細(xì)胞檢測等操作時(shí)，會(huì)使用到流式細(xì)胞儀等大型儀器。大部分的流式細(xì)胞儀都安裝在開放實(shí)驗(yàn)室中［４］，在這種非隔離的環(huán)境條件下，實(shí)驗(yàn)人員的粘膜及皮膚一旦與標(biāo)本的濺液直接接觸，也可能對(duì)實(shí)驗(yàn)人員造成感染。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物帶來的生物安全隱患在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，不可避免的需要使用到注射器、手術(shù)刀和其他種類的“利器”。如果實(shí)驗(yàn)室工作人員的皮膚因此受損，受到感染的概率會(huì)大大增加。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身的質(zhì)量是最為關(guān)鍵的因素。使用微生物學(xué)質(zhì)量不合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，很可能引入各種類型的人獸共患病或動(dòng)物烈性傳染病病原體。例如，２０１０年東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的一次羊活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，由于未對(duì)羊進(jìn)行嚴(yán)格檢驗(yàn)，而致使２８名師生感染布魯氏桿菌，造成了嚴(yán)重的生物安全事故。另外，即便是清潔級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，同樣可能攜帶生物感染因子。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自身的屬性決定了其作為獨(dú)立的生命體，攜帶微生物的概率與普通物品相比高出很多。而實(shí)驗(yàn)動(dòng)物又只能經(jīng)潔凈運(yùn)輸和外包裝消毒完成凈化［５］，無法接受其他更為直接的消毒方式，因此更易攜帶感染因子。需要引起重視的是，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的日常飼養(yǎng)過程中，管理不當(dāng)同樣可能導(dǎo)致原本潔凈的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物受到病原微生物的污染。如果被感染的動(dòng)物通過呼吸、糞便和尿液將病原體傳播至整個(gè)室內(nèi)環(huán)境，而實(shí)驗(yàn)人員恰好疏于防護(hù)，就很有可能因接觸到污染物而被感染。２００７年３月，廣州市某高校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心發(fā)生的腎綜合征出血熱感染事件［６］，便是因?yàn)橐笆髮⒉《緜鞑ブ灵_放飼養(yǎng)區(qū)大白鼠，最終導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室工作人員感染發(fā)病的。

實(shí)驗(yàn)試劑及廢棄物帶來的安全隱患醫(yī)學(xué)研究涉及的生化試劑種類繁多，性能和毒性各自不同。常見的劇毒種類有溴化乙錠、Ｔｒｉｚｏｌ、丙烯酰胺、ＤＥＰＣ、甲酰胺等。在操作這些試劑的過程中，通過氣溶膠產(chǎn)生擴(kuò)散污染是最常見的危害方式［７］。例如在吸取氯仿、四氯化碳等有毒揮發(fā)性氣體時(shí)，氣溶膠會(huì)直接刺激和腐蝕實(shí)驗(yàn)人員的皮膚、眼睛、呼吸道等。若被實(shí)驗(yàn)人員大量吸入，則可對(duì)其造成嚴(yán)重的肝腎損傷。實(shí)驗(yàn)廢棄物，具有攜帶各種類型感染因子的可能。較為常見的種類包括沾有殘液的廢棄槍頭、ＥＰ管、針頭等等，均需小心處理。除此之外，對(duì)基因操作完成后產(chǎn)生的抗藥性菌株，也需完全滅活后才可丟棄。這些抗藥性菌株是經(jīng)過增殖、重組、質(zhì)粒轉(zhuǎn)化步驟之后，篩選出的陽性克隆，一旦隨意丟棄任其與環(huán)境中的致病菌交換遺傳物質(zhì)，令致病菌由此獲得抗藥性，則會(huì)引發(fā)相當(dāng)嚴(yán)重的后果。

開展生物安全培訓(xùn)在實(shí)際工作中，預(yù)防實(shí)驗(yàn)室生物安全事故的最有效措施，是做好人員的培訓(xùn)工作。生物安全意識(shí)，需要從人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的第一天起開始培養(yǎng)，即設(shè)立完整的生物安全專項(xiàng)培訓(xùn)計(jì)劃。在培訓(xùn)過程中，可以考慮以下幾個(gè)重點(diǎn)問題：首先，讓被培訓(xùn)人員了解實(shí)驗(yàn)室內(nèi)容易發(fā)生感染的途徑及原因，提高自身的安全防范意識(shí)，盡量避免如誤食、皮膚切割、針刺、動(dòng)物抓咬以及有害氣體吸入等導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室感染事故的發(fā)生［８］。其次，針對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，進(jìn)行操作技術(shù)方面的具體培訓(xùn)，從而讓被培訓(xùn)人員充分掌握生物安全操作的整個(gè)流程。如高壓滅菌器、生物安全柜、通風(fēng)櫥和超凈工作臺(tái)等生物安全設(shè)備的使用方法；移液管和電動(dòng)移液器使用方法；標(biāo)本在每一個(gè)操作過程中的處置標(biāo)準(zhǔn)及廢棄物處理；個(gè)人防護(hù)措施；誤操作的處理辦法等內(nèi)容。有數(shù)據(jù)顯示，實(shí)驗(yàn)室感染中６５％以上的感染是由氣溶膠引起的［９］。因此需要特別強(qiáng)調(diào)氣溶膠的重要性，輕柔操作易產(chǎn)生氣溶膠的步驟，包括離心、混合震蕩、電動(dòng)勻漿、移液器吹打、開啟橡膠瓶塞、去注射器針頭等，以最大程度的減少空氣污染。在整個(gè)培訓(xùn)結(jié)束后，可利用考核的方式檢驗(yàn)培訓(xùn)效果，凡取得培訓(xùn)合格證的人員才允許開展相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室制度建設(shè)實(shí)驗(yàn)室安全事故的嚴(yán)重后果，充分說明了加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室制度建設(shè)的重要性和迫切性。世界衛(wèi)生組織１９８３年頒布的《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)（第一版）》是全世界第一部有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全和減少實(shí)驗(yàn)室事故發(fā)生的指導(dǎo)性規(guī)程，該手冊(cè)經(jīng)過２００３年及２００５年的兩次改版，已被世界各地廣泛接受和使用。經(jīng)過了多年的發(fā)展，我國也已出臺(tái)多部有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全的國家標(biāo)準(zhǔn)，如ＧＢ１９７８１－２００５《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全要求》、ＧＢ１９４８９－２００８《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》、國務(wù)院令第４２４號(hào)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》等。在實(shí)驗(yàn)室管理過程中，需要嚴(yán)格執(zhí)行這些指導(dǎo)性要求。除了指導(dǎo)性要求建立的制度框架之外，對(duì)于本單位的實(shí)際情況，還可以設(shè)立各項(xiàng)詳細(xì)的生物安全管理制度及規(guī)范，全面提升管理的有效性。例如，評(píng)估實(shí)驗(yàn)的生物安全風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別；動(dòng)物管理制度；實(shí)驗(yàn)日志制度；值周制度；違規(guī)懲罰制度；冰箱及超低溫冰箱試劑樣品保存制度；儀器操作規(guī)范；個(gè)人防護(hù)要求；安全消毒程序；危險(xiǎn)隱患報(bào)告程序；生物安全事故應(yīng)急體系和預(yù)案等。從而最大程度的避免和控制這類生物安全事故的發(fā)生。

緊抓思想監(jiān)督從已被報(bào)道的多起生物安全事故中不難發(fā)現(xiàn)，與實(shí)驗(yàn)人員麻痹大意有關(guān)的意外事件占了很大比例。２００３～２００４年間，新加坡、中國臺(tái)灣和中國大陸三地實(shí)驗(yàn)室，就曾分別發(fā)生因?qū)嶒?yàn)人員疏忽而造成的ＳＡＲＳ實(shí)驗(yàn)室感染事故?？梢哉f，主觀上不遵守實(shí)驗(yàn)室的安全操作規(guī)則和程序，即便有再完善的設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)的操作程序也無法杜絕所有安全事故的發(fā)生。通常情況下，任何一位初進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的人員，都會(huì)在種種警告下格外小心，完全按照標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范進(jìn)行操作，但久而久之后卻會(huì)在思想上有所松懈，產(chǎn)生一系列不安全行為。如使用高壓滅菌鍋時(shí)，隨意減少滅菌時(shí)間或壓力，導(dǎo)致滅菌效果無法保證；超速離心機(jī)轉(zhuǎn)子在兩端未完全配平的情況下離心，離心管出現(xiàn)破損，導(dǎo)致樣品外溢；實(shí)驗(yàn)過程中，省略必要的防護(hù)；操作不夠輕柔，產(chǎn)生不必要的氣溶膠懸浮污染；人疲勞操作，引發(fā)不安全行為等。因此，實(shí)驗(yàn)室管理人員，在努力提高自身業(yè)務(wù)能力的同時(shí)，需進(jìn)一步改進(jìn)管理方式，提高效率，保證效果。只有管理者和被管理者共同努力，才可能將事故的風(fēng)險(xiǎn)降至最低。日常工作中，除了管理人員監(jiān)督之外，積極的引導(dǎo)每位實(shí)驗(yàn)成員參與到思想監(jiān)督的工作中去。實(shí)行周內(nèi)負(fù)責(zé)制，管理人員帶班的研究生值日制等方式，均可作為很好的思路進(jìn)行嘗試。