近年來隨著尿液分析儀的迅速普及,測量參數向著快速、簡便、準確的方向發展,為臨床提供了更好的診斷依據;顯微鏡檢查耗時費力,在一些醫院尿液顯微鏡檢查有逐漸被尿液分析儀替代的趨勢。為此,筆者對400例門診患者的隨機尿樣,用尿液分析儀潛血反應和尿液顯微鏡檢查紅細胞兩種方法進行檢驗,并對兩種方法的符合程度進行比較。
1原理與方法
1.1尿液分析儀使用的是干化學試紙法,是根據多聯試帶上各模塊與尿液成分發生化學反應后顏色變化的深淺來檢測尿液中的某化學物質,如直接檢測紅細胞、白細胞的胞質內涵物,間接推斷細胞的有無。尿液分析儀潛血反應原理是:血紅蛋白(Hb)中亞鐵血紅素的過氧化物酶樣活性可使過氧化物分解釋放出新生態,后者氧化底物鄰甲苯胺變成鄰聯甲苯胺發生由黃色→草綠色→深藍色的顏色變化。尿液顯微鏡檢查則是通過顯微鏡的放大作用直接將細胞等有形成分直觀真實地呈現在鏡下,是對底物的真實反映。
1.2方法[2]
1.2.1尿液分析儀檢測尿潛血于混勻的10 ml新鮮尿液中浸入尿試紙條1s后取出,上儀器進行測定,自動打印結果。結果報告分為:(-、+/-、+、++、+++、++++)。使用URiSCANTM尿液分析儀及其配套的尿分析試紙條。
1.2.2鏡檢取尿液10 ml于試管中,以1500r/min離心5min,棄去上清液,留沉淀0.2 ml。充分混勻后,取出約20μl于載玻片上,加蓋玻片(2.0 cm×2.0 cm),然后用較弱的光線以低倍鏡觀察全貌,以免漏掉量少而有意義的物體,再用高倍鏡辨認細胞。結果報告為:х個/高倍視野(HP)。
2結果
400例門診患者的隨機尿樣用兩種方法同時檢查。
3討論
由于兩種檢驗方法的原理不同,影響其因素也不同,因而兩種檢驗方法的結果存在一定的差異。
3.1假陽性即尿液分析儀潛血反應陽性,鏡檢陰性,其常見原因有:①血紅蛋白(Hb)尿液分析儀潛血反應既能與完整的RBC發生陽性反應,也可與RBC溶解釋放的Hb發生陽性反應,而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量極微,定性為陰性。疾病時,尿中Hb有兩個來源:一是發生血管內溶血,血漿Hb超過了結合珠蛋白的結合能力,游離Hb從尿中排出。另一個是尿路(尤其是上尿路)出血,RBC在高滲或(和)低滲時破壞Hb逸出。此時,尿液分析儀潛血反應陽性,但尿沉渣鏡檢不見RBC或僅見RBC碎片;②肌紅蛋白(Mb)分子中也含有血紅素基團,具有過氧化物酶活性。
Mb主要存在于心肌和骨骼肌組織中,正常人尿中含量甚微,不能檢出。當心肌或骨骼肌發生嚴重損傷時,血漿Mb增高,經腎臟排泄,使尿液Mb含量增高,故潛血反應呈陽性,鏡檢RBC為陰性;③某些患者尿液中含有對熱不穩定酶,也可使試劑塊發生顏色改變,出現潛血反應陽性,鏡檢為陰性;④某些氧化性污染物,例如次氯酸鹽會導致潛血反應假陽性;⑤菌尿尿液是細菌良好的培養基,菌尿時有些細菌會產生氧化性物質,使得試劑塊發生顏色變化,導致潛血反應陽性,鏡檢RBC為陰性[3]。此外,微生物過氧化酶的侵入也可引起假陽性;⑥長時間存放及高溫實驗證明,標本不新鮮,存放時間長或高溫存放,使潛血反應的陽性率相對增高,而RBC鏡檢相應減少,測試結果極有可能出現假陽性。因此,建議尿液標本存放時間不得超過4 h[2];⑦尿試紙條的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正確,均可造成測試結果假陽性;⑧尿液分析儀靈敏度過高[0.2 mg/dl出現(++)],“級差”范圍太大[0.8~50 mg/dl級為(+++)],常會遇到儀器測試為(++),而鏡檢測試紅細胞為陰性,臨床上又找不到任何導致血紅蛋白尿原因的情況。再是尿中的圓形草酸鈣結晶的大小及形態和紅細胞非常相似,可導至尿液分析儀對紅細胞的錯誤判斷。
3.2假陰性即鏡檢陽性,尿液分析儀潛血反應陰性,其常見原因有:①食物或藥物的影響:由于飲食或藥物使尿液呈堿性時,RBC溶解破裂,形成褐色顆粒,潛血反應呈陽性,而鏡檢呈陰性;②VitC尿液中大量存在時,能競爭性奪取反應產生的氧,引起假陰性反應;③高比重、高蛋白尿影響結果。
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